α3d Tubulin Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400024-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- α3d TubulinO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase α3d Tubulin (h) e o Plasmídeo Double Nickase α3d Tubulin (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para TUBA3D. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
α3d Tubulin Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400024-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
α3d Tubulin Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400024-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TUBA3D codifica a tubulina α3d, uma subunidade estrutural dos microtúbulos que se associa à β-tubulina e sustenta a organização do citoesqueleto, o transporte intracelular e a montagem do fuso mitótico. Como parte do conjunto de heterodímeros de tubulina, a tubulina α3d contribui para a instabilidade dinâmica dos microtúbulos, que fundamenta a divisão celular, a polaridade e o tráfego vesicular, interagindo com vias reguladas por proteínas associadas a microtúbulos e por complexos motores como cinesinas e dineína. Alterações na expressão de isoformas de tubulina e na regulação dos microtúbulos são amplamente relevantes para aneuploidia, instabilidade cromossômica e mudanças na motilidade celular, processos frequentemente estudados na biologia do câncer e em contextos de neurodesenvolvimento. Assim, TUBA3D é um alvo útil para dissecar fenótipos dependentes de microtúbulos, remodelamento do citoesqueleto e progressão do ciclo celular em sistemas celulares humanos.
α3d Tubulin O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus TUBA3D em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de TUBA3D. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função TUBA3D. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com TUBA3D interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.