Plasmide Double Nickase (h) α3d Tubulin: sc-400024-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) α3d Tubulin correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide α3d Tubulin Double Nickase (h) et le plasmide α3d Tubulin Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant TUBA3D. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) α3d Tubulin | sc-400024-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) α3d Tubulin | sc-400024-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TUBA3D code l’α3d-tubuline, une sous-unité structurelle des microtubules qui s’associe à la β‑tubuline et contribue à l’organisation du cytosquelette, au transport intracellulaire et à l’assemblage du fuseau mitotique. En tant que composant du pool d’hétérodimères de tubuline, l’α3d‑tubuline participe à l’instabilité dynamique des microtubules, un mécanisme fondamental pour la division cellulaire, la polarité et le trafic vésiculaire, en interaction avec des voies régulées par les protéines associées aux microtubules et des complexes moteurs tels que les kinésines et la dynéine. Les perturbations de l’expression des isotypes de tubuline et de la régulation des microtubules sont largement impliquées dans l’aneuploïdie, l’instabilité chromosomique et les modifications de la motilité cellulaire, des processus fréquemment étudiés en biologie du cancer et dans des contextes neurodéveloppementaux. TUBA3D constitue donc une cible utile pour disséquer les phénotypes dépendants des microtubules, le remodelage du cytosquelette et la progression du cycle cellulaire dans des systèmes cellulaires humains.
α3d Tubulin Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus TUBA3D dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de TUBA3D. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de TUBA3D. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de TUBA3D.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.