ZNF575 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-430383

Visão geral

O gene murino Zfp575 codifica a proteína de dedo de zinco ZNF575, um regulador transcricional putativo com capacidade de ligação ao DNA dentro da família de dedos de zinco do tipo C2H2, frequentemente associada ao controlo específico por sequência da expressão génica. Embora a anotação funcional ainda seja limitada, proteínas desta classe modulam geralmente programas transcricionais associados à cromatina que influenciam o estado celular, a diferenciação e as respostas a sinais de desenvolvimento ou ambientais. Assim, a ZNF575 é relevante para a investigação de redes de regulação génica e de mecanismos epigenéticos que moldam a transcrição específica de tecido. A desregulação do controlo transcricional mediado por dedos de zinco está amplamente associada a alterações na proliferação, na estabilidade do genoma e a assinaturas de expressão associadas a doenças, sustentando estudos exploratórios de Zfp575 nestes contextos.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ZNF575 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Zfp575 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Zfp575, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Zfp575 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ZNF575.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Zfp575 para a investigação da sinalização de ZNF575, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Zfp575 críticos para a função ZNF575
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Zfp575 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo ZNF575 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo ZNF575 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Zfp575. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo ZNF575 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR ZNF575 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Zfp575 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Zfp575 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.