Plásmido Doble Nickase (m) ZIP10: sc-432673-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)ZIP10 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa ZIP10 (m) y el plásmido de doble nickasa ZIP10 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Slc39a10. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) ZIP10 | sc-432673-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) ZIP10 | sc-432673-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Slc39a10 codifica el transportador de entrada de zinc ZIP10 (familia SLC39) en ratón, que regula la disponibilidad de Zn²⁺ citosólico y los programas enzimáticos y transcripcionales dependientes de zinc aguas abajo. Al controlar la entrada de zinc a través de las membranas celulares, ZIP10 influye en procesos como la transducción de señales, las respuestas al estrés oxidativo y la función de las células inmunitarias, donde el zinc actúa como segundo mensajero y cofactor. La alteración de la homeostasis del transporte de zinc se ha asociado con inflamación desregulada y estrés metabólico, y el manejo del zinc dependiente de ZIP10 se estudia con frecuencia en el contexto de la biología hematopoyética y epitelial. En consecuencia, Slc39a10 es relevante para investigaciones mecanísticas de vías reguladas por zinc, incluida la señalización de citocinas, el control redox y los programas de diferenciación celular.
ZIP10 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Slc39a10 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Slc39a10. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Slc39a10. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Slc39a10 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.