Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
ZIP-kinase Antibody (C-3): sc-514223. Western blot analysis of ZIP-kinase expression in HeLa (A), K-562 (B) and HCT-116 (C) whole cell lysates. Detection reagent used: m-IgG1 BP-HRP: sc-525408.
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ZIP-kinase CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-409173
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- ZIP-kinase CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在ZIP-kinase基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：ZIP-kinase: sc-514223，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
ZIP-kinase CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-409173 | 20 µg | $397.00 |
概述
DAPK3（ZIP-kinase）是一种受 Ca2+/钙调蛋白调控的丝氨酸/苏氨酸激酶，通过磷酸化肌球蛋白调节轻链及相关细胞骨架底物，协同调控肌动蛋白-肌球蛋白动力学与收缩性信号传导。它参与应力纤维形成、膜起泡（blebbing）、胞质分裂以及程序性细胞死亡等通路，将细胞骨架重塑与细胞应激反应联系起来。ZIP-kinase 的活性与 ROCK/MLCK 调控的细胞收缩过程发生交叉，并可通过磷酸化依赖的信号节点影响转录输出。DAPK3 信号失调与增殖、运动性和凋亡等表型改变相关，这些变化与肿瘤生物学密切相关；同时也与血管及炎症性疾病机制有关，在这些情况下平滑肌张力与细胞骨架组织会受到扰动。
ZIP-kinase CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中DAPK3基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对DAPK3基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏DAPK3开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使ZIP-kinase蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建DAPK3缺失的细胞模型，用于ZIP-kinase信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 ZIP-kinase 功能至关重要的 DAPK3 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 DAPK3 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 ZIP-kinase CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 ZIP-kinase CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 DAPK3 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 ZIP-kinase HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 ZIP-kinase HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由DAPK3同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定DAPK3靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。