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ZHX2慢病毒激活颗粒(m) | sc-436490-LAC | 200 µl | $455.00 |
小鼠 Zhx2 基因编码锌指与同源盒蛋白 ZHX2。ZHX2 是一种核内转录因子,可与其他 ZHX 家族成员形成同源二聚体或异源二聚体,从而调控与分化及组织特异性稳态相关的基因表达程序。研究表明,ZHX2 与肝脏代谢网络调控、脂质与葡萄糖处理有关,并可通过占据启动子和增强子位点,更广泛地控制与增殖相关的转录状态。在肝脏生物学以及与肿瘤相关的转录重编程背景中,已有关于 ZHX2 活性改变的报道,这也支持将其作为研究代谢—增殖串扰的机制节点。作为转录调控因子,ZHX2 常在小鼠模型体系中被用于探究其如何塑造细胞命运决定以及应激反应相关基因表达。
ZHX2 慢病毒激活颗粒(m)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 Zhx2 表达。
ZHX2 慢病毒激活颗粒(m)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在Zhx2转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性ZHX2表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 Zhx2 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。