ZC3H14 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-429118-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ZC3H14O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ZC3H14 (m) e o Plasmídeo Double Nickase ZC3H14 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Zc3h14. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ZC3H14 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-429118-NIC | 20 µg | $410.00 |
O gene murino Zc3h14 codifica a ZC3H14, uma proteína de ligação a RNA do tipo dedo de zinco CCCH que se associa a RNA poli(A) e regula o controle gênico pós-transcricional por meio de efeitos sobre a poliadenilação, a estabilidade e a tradução de mRNAs. A ZC3H14 contribui para programas de processamento de RNA que moldam a expressão gênica durante o desenvolvimento neuronal e a função sináptica, conectando-se a vias mais amplas de metabolismo de mRNA no núcleo e no citoplasma. A desregulação de ortólogos de ZC3H14 tem sido associada a fenótipos do neurodesenvolvimento e a alterações na expressão gênica neuronal, tornando esse fator relevante para estudos mecanísticos de regulação de RNA em tipos celulares relevantes para o cérebro. Como regulador conservado do destino do mRNA, a ZC3H14 é frequentemente investigada em modelos de diferenciação neuronal, dinâmica de grânulos de RNA e homeostase do comprimento da cauda poli(A) em escala transcriptômica.
ZC3H14 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Zc3h14 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Zc3h14. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Zc3h14. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Zc3h14 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.