ZBTB5 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-411389

概要

ZBTB5（zinc finger and BTB domain containing 5）は、C2H2型ジンクフィンガーを介してDNAに結合するBTB/POZドメイン転写因子をコードしており、コリプレッサーやクロマチン修飾複合体をリクルートすることで、配列特異的な遺伝子発現制御因子として機能すると考えられています。細胞周期の進行、分化、エピジェネティック状態に関連する転写プログラムに影響を与えることで、ZBTB5は系譜特異的な遺伝子ネットワークや細胞恒常性の形成に関与し得ます。BTB–ジンクフィンガー型タンパク質の発現異常や活性変化は、がん性の転写再プログラミングやゲノム規模でのクロマチンアクセシビリティ変動としばしば関連するため、ZBTB5はがんおよび増殖生物学における機構解明研究の有用な標的となります。ヒト細胞モデルでは、ZBTB5を操作することで、転写抑制／活性化がクロマチンリモデリング、DNA複製タイミング、ストレス応答経路とどのように結び付くかを検証できます。

ZBTB5 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるZBTB5遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、ZBTB5内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、ZBTB5のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、ZBTB5タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、ZBTB5シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、ZBTB5欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• ZBTB5の機能に不可欠なZBTB5エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、ZBTB5ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• ZBTB5 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびZBTB5 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、ZBTB5遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  ZBTB5 HDRプラスミド（h）および ZBTB5 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはZBTB5ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のZBTB5標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。