Zap-70 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-423755

개요

Zap70는 세포질 티로신 키나아제 ZAP-70을 암호화하며, 항원 인지를 세포내 인산화 연쇄 반응으로 연결하는 T 세포 수용체(TCR) 및 CD3 복합체 하위의 핵심 신호 전달 매개체입니다. TCR이 활성화되면 ZAP-70은 CD3 사슬의 인산화된 ITAM에 모집되어 결합하고, LAT/SLP-76 스캐폴딩을 통해 신호를 전파함으로써 PLCγ1 활성화, 칼슘 유입, MAPK 신호, 그리고 NFAT/NF-κB/AP-1 전사 프로그램을 유도합니다. 마우스 면역생물학에서 Zap70는 흉선세포 선택, T 세포 성숙, 그리고 효과기 반응에 필수적이어서, 적응면역과 림프구 신호 전달 네트워크 연구의 중심이 됩니다. ZAP-70 경로 활성의 이상 조절은 면역결핍, 자가면역, 림프계 악성종양 생물학 모델과 관련이 있으며, 신호 역치의 변화가 발달과 활성화에 영향을 미칩니다.

Zap-70 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Zap70 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Zap70 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Zap70의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Zap-70 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Zap-70 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Zap70 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Zap-70 기능에 중요한 Zap70 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Zap70 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Zap-70 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 Zap-70 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Zap70 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Zap-70 HDR 플라스미드 (m) 및 Zap-70 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Zap70 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Zap70 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.