Y+LAT1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404403
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Y+LAT1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Y+LAT1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Y+LAT1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-404403 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
SLC7A7 codifica a Y+LAT1, uma subunidade de cadeia leve do sistema heteromérico de transporte de aminoácidos y+L, que atua em parceria com SLC3A2 (4F2hc/CD98) para mediar a troca de aminoácidos catiônicos, como lisina e arginina, por aminoácidos neutros através da membrana plasmática. Essa atividade de transporte contribui para o equilíbrio do nitrogênio celular e conecta a disponibilidade de aminoácidos à homeostase metabólica e a processos de detecção de nutrientes. A função de Y+LAT1 é especialmente relevante em contextos epiteliais e imunológicos, nos quais o fluxo de aminoácidos influencia o crescimento e as respostas de sinalização. A disrupção patogênica de SLC7A7 está associada à intolerância proteica lisinúrica, relacionando defeitos de transporte dependentes de Y+LAT1 a um desequilíbrio sistêmico de aminoácidos e a complicações inflamatórias subsequentes.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Y+LAT1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene SLC7A7 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do SLC7A7, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do SLC7A7 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Y+LAT1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de SLC7A7 para a investigação da sinalização de Y+LAT1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) SLC7A7 críticos para a função Y+LAT1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos SLC7A7 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Y+LAT1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Y+LAT1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus SLC7A7. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Y+LAT1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Y+LAT1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia SLC7A7 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo SLC7A7 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.