XRCC2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-403531

概要

XRCC2は、DNA二本鎖切断の相同組換え（HR）修復に機能するRAD51パラログをコードしており、鎖侵入過程におけるRAD51フィラメントの形成と安定化を支えます。このタンパク質は、複製フォークの完全性維持や複製ストレスに起因するDNA損傷の解決に不可欠で、ファンコニ貧血経路およびより広範なゲノム維持ネットワークと機能的に密接に関連しています。XRCC2の破綻はHR能を低下させ、染色体不安定性を増大させ、DNA架橋剤に対する感受性を高めることから、XRCC2機能不全はがん素因や関連するDNA修復欠損表現型と結び付けられています。HRの中核因子として、XRCC2はゲノム安定性、変異過程、DNA損傷応答シグナル伝達の機構研究で頻繁に解析されています。

XRCC2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるXRCC2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、XRCC2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、XRCC2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、XRCC2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、XRCC2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、XRCC2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• XRCC2の機能に不可欠なXRCC2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、XRCC2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• XRCC2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびXRCC2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、XRCC2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  XRCC2 HDRプラスミド（h）および XRCC2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはXRCC2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のXRCC2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。