VpreB3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423685
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- VpreB3 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico VpreB3, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
VpreB3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423685 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Vpreb3 codifica a VpreB3, uma proteína relacionada à cadeia leve substituta que participa da montagem de imunoglobulinas e do controle de qualidade durante o desenvolvimento das células B. Em células da linhagem B em desenvolvimento, VpreB3 está associada à proteostase do retículo endoplasmático e ao processamento de componentes da cadeia leve de imunoglobulinas, influenciando a maturação do receptor pré‑B e a competência de sinalização a jusante. A regulação alterada dessa via pode afetar estados de diferenciação de células B, a formação do repertório de anticorpos e respostas de estresse celular ligadas ao processamento associado ao RE. Essas características tornam o Vpreb3 um alvo útil para dissecar mecanismos de maturação de células B e de biossíntese de imunoglobulinas em modelos murinos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO VpreB3 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Vpreb3 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Vpreb3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Vpreb3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína VpreB3.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Vpreb3 para a investigação da sinalização de VpreB3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Vpreb3 críticos para a função VpreB3
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Vpreb3 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo VpreB3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo VpreB3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Vpreb3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo VpreB3 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR VpreB3 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Vpreb3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Vpreb3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.