VEZF1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423670

Visão geral

Vezf1 codifica a VEZF1, um fator de transcrição do tipo “zinc finger” enriquecido em contextos endoteliais vasculares e hematopoéticos, que regula programas de expressão gênica necessários para a angiogênese embrionária e o padrão de formação dos vasos. A VEZF1 atua no controle da diferenciação endotelial, do brotamento vascular e da manutenção da integridade vascular ao coordenar redes transcricionais ligadas à migração celular, ao remodelamento da matriz extracelular e a vias de sinalização do desenvolvimento. A atividade alterada de Vezf1 tem sido associada a defeitos na formação de vasos sanguíneos e letalidade durante o desenvolvimento em modelos murinos, e suas funções regulatórias a tornam relevante para o estudo de malformações vasculares e de vascularização tecidual comprometida. Como proteína nuclear ligante de DNA, a VEZF1 também oferece um ponto de investigação acessível para dissecar o controle transcricional da especificação da linhagem endotelial.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO VEZF1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Vezf1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Vezf1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Vezf1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína VEZF1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Vezf1 para a investigação da sinalização de VEZF1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Vezf1 críticos para a função VEZF1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Vezf1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo VEZF1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo VEZF1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Vezf1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo VEZF1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR VEZF1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Vezf1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Vezf1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.