vezatin Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-418454-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- vezatinO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase vezatin (h) e o Plasmídeo Double Nickase vezatin (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para VEZT. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:vezatin Anticorpo (B-1): sc-271347
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
vezatin Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-418454-NIC | 20 µg | $410.00 |
VEZT codifica a vezatina, um componente transmembranar das junções aderentes que acopla o complexo caderina–catenina ao citoesqueleto de actina e ajuda a estabilizar a adesão célula–célula. A vezatina participa da polaridade epitelial e da arquitetura dos tecidos ao sustentar a remodelação das junções durante a morfogênese e ao influenciar a dinâmica do citoesqueleto. A desregulação da expressão de VEZT ou de sua localização nas junções pode alterar a integridade da barreira e os programas de migração celular, processos frequentemente implicados na displasia epitelial e na progressão tumoral. Como um arcabouço associado às junções, a vezatina também é relevante para o estudo de mecanotransdução e da comunicação cruzada de sinalização na membrana plasmática, incluindo vias que respondem a mudanças na adesão celular.
vezatin O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus VEZT em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de VEZT. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função VEZT. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com VEZT interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.