VDUP1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-400664

概要

チオレドキシン相互作用タンパク質（TXNIP、別名VDUP1）は、酸化還元（レドックス）感受性の調節因子であり、チオレドキシンに結合して細胞の酸化ストレス応答とレドックス恒常性を調節します。TXNIPは、グルコース取り込み、ミトコンドリア機能、炎症性アウトプットに影響することで、栄養・ストレスシグナルを代謝制御へと結び付け、AMPKシグナル伝達、ROS（活性酸素種）の制御、NLRP3インフラマソーム関連プロセスなどの経路にも関与します。TXNIP/VDUP1の発現異常は、代謝調節異常、内皮機能障害、炎症状態と関連づけられており、糖尿病関連合併症、心血管生物学、がん細胞代謝といった文脈で頻繁に研究されています。ストレス誘導性遺伝子としてのTXNIPは、小胞体（ER）ストレスや酸化シグナル下流の転写プログラムの指標（リードアウト）であると同時に、その駆動因子としても用いられます。

VDUP1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるTXNIP遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、TXNIP内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、TXNIPのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、VDUP1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、VDUP1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、TXNIP欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• VDUP1の機能に不可欠なTXNIPエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、TXNIPゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• VDUP1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびVDUP1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、TXNIP遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  VDUP1 HDRプラスミド（h）および VDUP1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはTXNIPホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のTXNIP標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。