Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
VDAC1/Porin Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-418200-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- VDAC1/PorinO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase VDAC1/Porin (h) e o Plasmídeo Double Nickase VDAC1/Porin (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para VDAC1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:VDAC1/Porin Anticorpo (B-6): sc-390996
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
VDAC1/Porin Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-418200-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
VDAC1/Porin Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-418200-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
VDAC1 (canal aniônico dependente de voltagem 1), também conhecido como porina, é um dos principais canais na membrana externa mitocondrial que medeia a troca de ATP/ADP, íons e metabólitos-chave entre a mitocôndria e o citosol. Ao controlar a permeabilidade da membrana externa e coordenar interações com a hexoquinase e proteínas da família BCL-2, o VDAC1 integra o metabolismo energético celular com a sinalização apoptótica, a homeostase do cálcio e o equilíbrio redox. A função do VDAC1 se cruza com a fosforilação oxidativa, o acoplamento glicolítico e processos associados às membranas associadas à mitocôndria que moldam a dinâmica mitocondrial e as respostas ao estresse. A expressão desregulada de VDAC1 ou a atividade do canal tem sido associada a alterações bioenergéticas e disfunção mitocondrial observadas em pesquisas sobre biologia do câncer, neurodegeneração e doenças metabólicas.
VDAC1/Porin O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus VDAC1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de VDAC1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função VDAC1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com VDAC1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.