Plásmido Doble Nickase (h) USP9X: sc-402285-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)USP9X consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa USP9X (h) y el plásmido de doble nickasa USP9X (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a USP9X. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) USP9X | sc-402285-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) USP9X | sc-402285-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
USP9X codifica una gran proteasa específica de ubiquitina que elimina la ubiquitina de proteínas diana para regular su estabilidad, localización y salida de señalización. USP9X participa en la proteostasis dependiente de ubiquitina y se conecta con vías que controlan decisiones de destino celular, la progresión del ciclo celular, las respuestas al daño del ADN y la señalización de estrés, incluida la modulación de redes de quinasas y de apoptosis. A través de su actividad desubiquitinante, USP9X influye en el tráfico endocítico y en el recambio proteico de factores reguladores clave, configurando así programas transcripcionales y la homeostasis celular. La expresión o actividad desregulada de USP9X se ha asociado con estados de señalización alterados observados en trastornos del neurodesarrollo y en múltiples contextos de cáncer, lo que la convierte en un objetivo frecuente en estudios mecanísticos de la biología de la vía de la ubiquitina.
USP9X El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus USP9X en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de USP9X. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de USP9X. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con USP9X alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.