USP28 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-433446

概要

Usp28は、ユビキチン特異的ペプチダーゼ28（USP28）をコードしており、ユビキチン鎖を編集してタンパク質の安定性や分解（ターンオーバー）を制御する脱ユビキチン化酵素です。USP28はユビキチン依存的な品質管理やシグナル伝達過程に関与し、主要な制御因子の量を調節することで、DNA損傷応答、細胞周期の進行、転写プログラムに影響を与えます。これらの作用を通じて、USP28はゲノム安定性、ストレスシグナル、プロテオスタシスに関連する経路において研究されています。USP28の機能変化は、増殖制御の破綻や腫瘍性シグナル伝達が関与する状況と関連づけられており、がん生物学および関連する細胞モデルにおける機構研究で重要な対象となっています。

USP28 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるUsp28遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Usp28内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Usp28のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、USP28タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、USP28シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Usp28欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• USP28の機能に不可欠なUsp28エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Usp28ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• USP28 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびUSP28 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Usp28遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  USP28 HDRプラスミド（m）および USP28 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはUsp28ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のUsp28標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。