Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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UFD1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423598
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- UFD1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico UFD1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:UFD1 Anticorpo (B-7): sc-377265
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
UFD1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423598 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Ufd1l codifica a UFD1, um componente central do complexo segregase UFD1–NPL4–VCP/p97, que reconhece e extrai substratos poliubiquitinados para processamento posterior pelo sistema ubiquitina–proteassoma. Ao acoplar a sinalização por ubiquitina à remodelação proteica dependente de ATP, a UFD1 sustenta a degradação associada ao retículo endoplasmático (ERAD), o controle de qualidade de proteínas mal dobradas e a proteostase sob estresse celular. Essa via também se conecta à progressão do ciclo celular, às respostas a danos no DNA e à regulação de programas transcricionais por meio da renovação controlada de reguladores-chave. A desregulação de cofatores de p97 e de componentes de ERAD tem sido associada a fenótipos de estresse proteotóxico e a contextos de neurodegeneração e biologia do desenvolvimento, tornando Ufd1l um nó útil para estudos mecanísticos em modelos murinos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO UFD1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Ufd1l em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Ufd1l, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Ufd1l na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína UFD1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Ufd1l para a investigação da sinalização de UFD1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Ufd1l críticos para a função UFD1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Ufd1l para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo UFD1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo UFD1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Ufd1l. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo UFD1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR UFD1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Ufd1l para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Ufd1l definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.