UCH-L5 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-416520-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- UCH-L5O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase UCH-L5 (h) e o Plasmídeo Double Nickase UCH-L5 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para UCHL5. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:UCH-L5 Anticorpo (C-4): sc-271002
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
UCH-L5 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-416520-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
UCH-L5 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-416520-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
A UCHL5 humana (UCH-L5/UCH37) é uma enzima desubiquitinante que remove ubiquitina de substratos proteicos para regular a proteostase e a sinalização dependente de ubiquitina. Ela se associa à partícula regulatória 19S do proteassoma e também pode atuar no contexto do remodelamento de cromatina INO80, conectando a desubiquitinação à renovação/degradação de proteínas e ao controle transcricional. Ao modular a edição de cadeias de ubiquitina e o processamento de substratos, a UCH-L5 influencia a progressão do ciclo celular, respostas ao estresse e vias de estabilidade genômica. A atividade desregulada do sistema ubiquitina–proteassoma envolvendo a UCHL5 tem sido estudada no contexto da biologia do câncer e de defeitos de proteostase relacionados à neurodegeneração.
UCH-L5 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus UCHL5 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de UCHL5. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função UCHL5. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com UCHL5 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.