Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
UBE2F Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-426826-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- UBE2FO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase UBE2F (m) e o Plasmídeo Double Nickase UBE2F (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Ube2f. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:UBE2F Anticorpo (C-11): sc-398668
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
UBE2F Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-426826-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
UBE2F Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-426826-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene murino **Ube2f** codifica a **UBE2F**, uma enzima conjugadora E2 que dá suporte à neddilação ao transferir **NEDD8** para ligases **cullin–RING**, com forte ligação ao eixo **CUL5–RBX2**. Por essa via, a UBE2F contribui para uma modificação do tipo ubiquitina que ajusta o reconhecimento de substratos e sua degradação, moldando a proteostase, a progressão do ciclo celular e a sinalização adaptativa ao estresse. A perturbação da neddilação dependente de UBE2F pode alterar a atividade das CRLs e os programas transcricionais e apoptóticos a jusante, tornando **Ube2f** um ponto útil para estudar a desregulação da homeostase proteica em contextos relevantes para câncer e neurobiologia. Em modelos murinos, **Ube2f** é, portanto, frequentemente investigado para conectar a dinâmica da via de NEDD8 a mudanças na intensidade de sinalização e na degradação seletiva de proteínas.
UBE2F O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Ube2f em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Ube2f. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Ube2f. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Ube2f interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.