Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
TWIK-2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-407263-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TWIK-2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase TWIK-2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase TWIK-2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para KCNK6. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:TWIK-2 Anticorpo (H-6): sc-376515
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TWIK-2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-407263-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TWIK-2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-407263-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O KCNK6 humano codifica o TWIK-2, um canal de potássio (K2P) de dois poros que contribui para a condutância basal de K+ e ajuda a estabelecer o potencial de membrana de repouso e a excitabilidade da membrana. Ao moldar a homeostase iónica, o TWIK-2 influencia o acoplamento estímulo–secreção, a regulação do volume celular e processos de sinalização dependentes de Ca2+ em células excitáveis e não excitáveis. Alterações na atividade de canais K2P têm sido associadas a desregulação do tónus vascular, da sinalização inflamatória e a fenótipos relacionados com proliferação, tornando o KCNK6 um alvo relevante para estudos mecanísticos sobre a contribuição de canais iónicos em vias cardiometabólicas e associadas ao sistema imunitário. A função do TWIK-2 é frequentemente investigada no contexto de leituras eletrofisiológicas, dinâmica de sinalização intracelular e análises de perturbação ao nível de vias.
TWIK-2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus KCNK6 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de KCNK6. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função KCNK6. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com KCNK6 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.