TSPYL1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423529

Visão geral

Tspyl1 codifica a TSPYL1, um membro da família de proteínas de montagem de nucleossomos (NAP) implicado na organização da cromatina e na regulação transcricional. Em células de camundongo, a TSPYL1 tem sido associada ao controle da progressão do ciclo celular e da diferenciação por meio da modulação epigenética de programas de expressão gênica, influenciando processos como a transcrição dependente de molde de DNA e a acessibilidade da cromatina. Ao moldar estados de cromatina, a TSPYL1 pode afetar vias que governam a proliferação e as respostas celulares ao estresse, o que a torna relevante para estudos de fenótipos do desenvolvimento e de mecanismos de transformação oncogênica. A desregulação de proteínas da família TSPYL tem sido associada a alterações no controle de crescimento e a assinaturas transcricionais relacionadas a doenças, sustentando seu uso como alvo em genômica funcional.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TSPYL1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Tspyl1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Tspyl1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Tspyl1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TSPYL1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Tspyl1 para a investigação da sinalização de TSPYL1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Tspyl1 críticos para a função TSPYL1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Tspyl1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo TSPYL1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo TSPYL1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Tspyl1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo TSPYL1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR TSPYL1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Tspyl1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Tspyl1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.