TRPM8 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401744-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TRPM8O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase TRPM8 (h) e o Plasmídeo Double Nickase TRPM8 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para TRPM8. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TRPM8 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401744-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TRPM8 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401744-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O TRPM8 codifica o canal transient receptor potential melastatin 8 (TRPM8), um canal iónico permeável a Ca²⁺, sensível ao frio e ao mentol, que converte estímulos térmicos e químicos em despolarização da membrana e em sinalização de cálcio a jusante. A atividade do TRPM8 influencia a excitabilidade neuronal, a transdução sensorial e processos dependentes de cálcio, incluindo a sinalização por cinases e respostas transcricionais. Em contextos não neuronais, o TRPM8 tem sido implicado na regulação da proliferação celular, migração e sinalização de stress através de vias acopladas ao fluxo de iões. A expressão ou função desregulada do TRPM8 tem sido associada a alterações na nociceção e tem sido investigada no contexto da biologia tumoral e da sinalização inflamatória como um modulador da homeostase do cálcio celular.
TRPM8 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus TRPM8 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de TRPM8. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função TRPM8. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com TRPM8 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.