TRIM5α Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-409348-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TRIM5αO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase TRIM5α (h) e o Plasmídeo Double Nickase TRIM5α (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para TRIM5. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TRIM5α Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-409348-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TRIM5α Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-409348-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TRIM5 (TRIM5α) é uma ligase E3 de ubiquitina com motivo tripartido induzível por interferão que atua como fator de restrição intrínseco contra a infeção por retrovírus, ao reconhecer cápsides que entram na célula e desencadear um desencapsidamento prematuro. Por meio da sua atividade de ubiquitinação dependente do domínio RING e da montagem em estruturas reticulares de ordem superior, a TRIM5α ativa sinalização imunitária inata, incluindo as vias de NF-κB e AP-1, e interage com mecanismos de controlo de qualidade proteica ligados ao proteassoma e à autofagia. A TRIM5α também participa no reconhecimento de padrões no citosol e contribui para moldar programas transcricionais inflamatórios após um desafio viral. Variações ou uma regulação alterada de TRIM5 têm sido estudadas no contexto da suscetibilidade à replicação retroviral, da capacidade de resposta imunitária antiviral e de uma desregulação mais ampla da sinalização imunitária inata relevante para modelos de doenças inflamatórias.
TRIM5α O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus TRIM5 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de TRIM5. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função TRIM5. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com TRIM5 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.