TREM-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-425490

概要

トリガー受容体（Triggering receptor）として知られるTREM-1（triggering receptor expressed on myeloid cells 1）は、主に好中球および単球／マクロファージに発現する免疫受容体で、パターン認識受容体によって開始される炎症応答を増幅します。マウスでは、TREM-1シグナルはアダプター介在性経路と統合され、NF-κBおよびMAPKの活性化を増強することで、炎症性サイトカインやケモカインの産生を高め、自然免疫のエフェクター機能を強化します。Trem1活性は、急性および慢性炎症における骨髄系細胞の動員・活性化、ならびに内皮系や間質系コンパートメントとのクロストークと密接に関連しています。TREM-1シグナルの制御異常は、炎症性疾患や感染症のモデルに加え、腫瘍随伴性の骨髄系細胞表現型や、過剰なサイトカイン応答によって駆動される組織障害の経路とも関連づけられています。

TREM-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるTrem1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Trem1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Trem1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、TREM-1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、TREM-1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Trem1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• TREM-1の機能に不可欠なTrem1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Trem1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• TREM-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびTREM-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Trem1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  TREM-1 HDRプラスミド（m）および TREM-1 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはTrem1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のTrem1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。