Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (m) TRAP150: sc-432980-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)TRAP150 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa TRAP150 (m) y el plásmido de doble nickasa TRAP150 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Thrap3. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: TRAP150 Anticuerpo (F-10): sc-133250
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) TRAP150 | sc-432980-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) TRAP150 | sc-432980-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Mouse Thrap3 codifica TRAP150, un factor nuclear de unión a ARN asociado a la transcripción, implicado en el acoplamiento de la transcripción con el empalme (splicing) del pre-ARNm y el procesamiento del extremo 3′. TRAP150 participa en la maduración de los mRNP e interactúa con componentes del espliceosoma y de la maquinaria transcripcional, influyendo en decisiones de empalme alternativo y en programas de expresión génica. Estas funciones vinculan a Thrap3 con la regulación de la progresión del ciclo celular y con redes transcripcionales sensibles al estrés que con frecuencia se ven alteradas en la biología del cáncer. La alteración del empalme y de la coordinación transcripcional asociadas a la actividad de TRAP150 hace que este gen sea relevante para estudiar los mecanismos subyacentes a la expresión génica oncogénica y a los defectos de procesamiento de ARN.
TRAP150 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Thrap3 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Thrap3. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Thrap3. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Thrap3 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.