TOB1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423508
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TOB1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico TOB1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:TOB1 Anticorpo (E-1): sc-133095
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TOB1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423508 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Tob1 codifica a TOB1, um membro da família antiproliferativa BTG/TOB que atua como um corregulador transcricional de resposta imediata (immediate-early) e modula a progressão do ciclo celular. A TOB1 é regulada por fosforilação dependente de MAPK e interage com programas transcricionais mediados por SMAD para moldar as respostas de sinalização de TGF-β, incluindo efeitos sobre diferenciação e restrição do crescimento. Em células imunes, a TOB1 contribui para a manutenção dos limiares de ativação e da tolerância ao atenuar a ativação de células T e a produção de citocinas, vinculando-a a vias que controlam a homeostase imunológica. Alterações na atividade de TOB1 têm sido associadas à proliferação desregulada e a fenótipos relacionados ao sistema imune, tornando-a relevante para estudos mecanísticos de sinalização oncogênica, inflamação e remodelamento tecidual em modelos murinos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TOB1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Tob1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Tob1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Tob1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TOB1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Tob1 para a investigação da sinalização de TOB1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Tob1 críticos para a função TOB1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Tob1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo TOB1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo TOB1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Tob1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo TOB1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR TOB1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Tob1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Tob1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.