Tns2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-411726

Visão geral

O TNS2 codifica a tensina-2 (Tns2), um adaptador do citoesqueleto associado às adesões focais que liga recetores de integrina à rede de actina e organiza a sinalização nos locais de contacto célula–matriz. Através dos seus domínios modulares, a Tns2 coordena a montagem e a renovação dos complexos de adesão e modula vias envolvidas no espalhamento celular, na migração e na mecanotransdução, incluindo sinalização dependente de fosfoinositídeos e eventos acoplados a recetores tirosina-quinase. Alterações na função do TNS2 têm sido associadas a desregulação da sinalização de adesão e da homeostase tecidular, com particular relevância para a biologia glomerular do rim e a integridade dos podócitos. Estas propriedades tornam o TNS2 um alvo útil para estudar a sinalização impulsionada pela adesão, a remodelação do citoesqueleto e alterações dependentes do contexto na invasividade e na diferenciação celulares.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Tns2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene TNS2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do TNS2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do TNS2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Tns2.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de TNS2 para a investigação da sinalização de Tns2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) TNS2 críticos para a função Tns2
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos TNS2 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Tns2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Tns2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus TNS2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Tns2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Tns2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia TNS2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo TNS2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.