TMEM205 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-433421

Visão geral

Tmem205 codifica a TMEM205, uma proteína de membrana multipasse implicada em processos de transporte celular na membrana plasmática e no sistema de endomembranas, com papéis descritos na regulação do acúmulo intracelular e do efluxo de xenobióticos e de compostos que contêm metais. A TMEM205 tem sido associada à remodelação adaptativa ao estresse do tráfego de membranas e do transporte vesicular, processos que se cruzam com a proteostase e com a resposta celular a agressões citotóxicas. A alteração da expressão de TMEM205 tem sido relacionada a fenótipos de resposta a fármacos em modelos de câncer, o que a torna um alvo útil para dissecar mecanismos de quimiorresistência e de regulação do transporte de membrana. Em sistemas murinos, a perturbação de Tmem205 pode ajudar a esclarecer como proteínas de membrana do tipo transportador influenciam a homeostase celular e a sensibilidade a desafios ambientais.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TMEM205 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Tmem205 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Tmem205, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Tmem205 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TMEM205.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Tmem205 para a investigação da sinalização de TMEM205, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Tmem205 críticos para a função TMEM205
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Tmem205 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo TMEM205 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo TMEM205 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Tmem205. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo TMEM205 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR TMEM205 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Tmem205 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Tmem205 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.