TMEM182 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-436273

개요

Tmem182는 예측상 여러 번 막을 관통하는 다중 통과(transmembrane) 막단백질인 TMEM182를 암호화하며, 골격근에서 발현이 풍부하고 근형성(myogenic) 분화 프로그램과의 연관성이 보고되어 있습니다. 분자 기능은 아직 완전히 규명되지는 않았지만, TMEM182는 근육의 발달과 재생에 수반되는 막 연관 신호전달 및 세포 리모델링 과정과 관련된 것으로 알려져 있습니다. 전사체 연구에서는 대사 적응과 염증성 자극이 관여하는 맥락에서 Tmem182의 조절이 보고되어, 근육 항상성과 스트레스 반응을 형성하는 경로에서의 관련성을 시사합니다. 근육 관련 표현형 및 조직 리모델링의 실험 모델에서 발현 이상이 관찰되어, 근골격 생물학에서 기전 연구를 위한 표적으로 활용될 수 있음을 뒷받침합니다.

TMEM182 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Tmem182 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Tmem182 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Tmem182의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 TMEM182 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 TMEM182 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Tmem182 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• TMEM182 기능에 중요한 Tmem182 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Tmem182 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• TMEM182 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 TMEM182 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Tmem182 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  TMEM182 HDR 플라스미드 (m) 및 TMEM182 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Tmem182 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Tmem182 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.