TMEM134 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-406513

Übersicht

TMEM134 kodiert das Transmembranprotein 134, ein vermutlich mehrfach membranüberspannendes Protein, das wahrscheinlich in intrazellulären Membrankompartimenten lokalisiert und zur Organisation und zum Transport von Membranen beiträgt. Obwohl seine molekularen Bindungspartner noch nicht vollständig definiert sind, wurde TMEM134 mit Prozessen in Verbindung gebracht, die von der Endomembran-Dynamik abhängen, darunter Proteinsortierung, Rezeptorumsatz und stressresponsive Signalübertragung. Veränderte TMEM134-Expressionsmuster wurden in transkriptomischen Studien in mehreren Krankheitskontexten beschrieben, was seine Eignung als Kandidatenregulator in Signalwegen unterstützt, die für die zelluläre Homöostase relevant sind. Eine funktionelle Untersuchung von TMEM134 ist daher wertvoll, um membranassoziierte Mechanismen aufzuklären, die Signalausgänge, Proliferation und Überleben in menschlichen Zellmodellen modulieren.

Das TMEM134 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des TMEM134-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des TMEM134-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von TMEM134 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die TMEM134-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von TMEM134-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der TMEM134-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf TMEM134-Exone abzielen, die für die TMEM134-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere TMEM134-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom TMEM134 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom TMEM134 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des TMEM134-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das TMEM134 HDR-Plasmid (h) und TMEM134 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von TMEM134-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten TMEM134-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.