TICAM-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-414627

概要

TICAM1 は、Toll様受容体3（TLR3）およびTLR4シグナル伝達のうちTRAM依存性の分岐を自然免疫の転写プログラムへと結び付ける、細胞質アダプターである TICAM-1（TRIF とも呼ばれる）をコードします。受容体が活性化されると、TICAM-1 はシグナル伝達複合体の組み立てを統率し、TBK1/IKKε と IRF3 を介してI型インターフェロン応答を誘導します。また、NF-κB および MAPK 経路の活性化にも寄与し、炎症性サイトカインの発現制御に関与します。この分子は、二本鎖RNA（dsRNA）の抗ウイルス認識や、骨髄系細胞および上皮系細胞における自然免疫恒常性の調節において中心的な役割を担います。TICAM-1 シグナルの破綻は、ウイルス感染に対する宿主応答の変化や、免疫介在性疾患の機序に関連する炎症表現型に関与することが示唆されています。

TICAM-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるTICAM1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、TICAM1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、TICAM1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、TICAM-1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、TICAM-1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、TICAM1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• TICAM-1の機能に不可欠なTICAM1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、TICAM1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• TICAM-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびTICAM-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、TICAM1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  TICAM-1 HDRプラスミド（h）および TICAM-1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはTICAM1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のTICAM1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。