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Thy-1/CD90双切口酶质粒(m) | sc-423390-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Thy-1/CD90双切口酶质粒(m2) | sc-423390-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Thy1 编码糖基磷脂酰肌醇(GPI)锚定的细胞表面糖蛋白 Thy-1/CD90。它是在小鼠中广泛保守的标志物,主要见于神经元、成纤维细胞、间充质基质细胞以及部分 T 细胞亚群。Thy-1 可通过与整合素(integrins)、syndecan 等结合伙伴相互作用,参与细胞—细胞与细胞—基质的黏附过程,并影响黏着斑动力学、细胞骨架重塑和力学信号转导。通过这些机制,Thy-1 调控神经突起生长、轴突导向及免疫细胞激活,使其信号与组织重塑和炎症相关线索相联系。Thy-1 表达失衡与类似纤维化的基质激活、神经炎症以及肿瘤微环境表型有关,因此在研究依赖黏附的信号通路与细胞谱系身份时具有重要意义。
Thy-1/CD90 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Thy1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Thy1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Thy1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Thy1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。