THOC1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403390

Visão geral

THOC1 codifica uma subunidade central do complexo THO/TREX, que acopla a transcrição ao processamento do mRNA e à exportação nuclear, coordenando a montagem co-transcricional de ribonucleoproteínas mensageiras (mRNPs). Por meio de interações com a RNA polimerase II e fatores de exportação, THOC1 sustenta a maturação de transcritos em todo o genoma, preserva a homeostase de R-loops e ajuda a manter a integridade da replicação e da transcrição. A perturbação da exportação de RNA dependente de THOC1 pode afetar a progressão do ciclo celular e as respostas ao estresse, ligando esse fator a vias que influenciam a estabilidade do genoma. Alterações na expressão de THOC1 e disfunções do complexo TREX foram observadas em múltiplos contextos relacionados ao câncer e em estudos de distúrbios do metabolismo de RNA, tornando THOC1 um ponto útil para investigações mecanísticas.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO THOC1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene THOC1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do THOC1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do THOC1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína THOC1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de THOC1 para a investigação da sinalização de THOC1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) THOC1 críticos para a função THOC1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos THOC1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo THOC1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo THOC1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus THOC1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo THOC1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR THOC1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia THOC1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo THOC1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.