TGase3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406800
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TGase3 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico TGase3, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:TGase3 Anticorpo (H3): sc-101366
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TGase3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406800 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
TGM3 codifica a transglutaminase 3 (TGase3), uma enzima dependente de cálcio que catalisa a ligação cruzada de proteínas por meio da formação de ligações isopeptídicas ε-(γ-glutamil)lisina. A TGase3 é mais conhecida por seu papel em programas de diferenciação terminal, contribuindo para a estabilização do citoesqueleto e de complexos proteicos extracelulares durante a maturação epitelial e a formação da barreira. Sua atividade se cruza com vias que regulam a diferenciação de queratinócitos, o reparo de feridas e a remodelação de proteínas estruturais, conectando a ligação cruzada enzimática à homeostase tecidual. A atividade desregulada de transglutaminases e a expressão alterada de TGM3 têm sido associadas a processos inflamatórios e neoplásicos em tecidos epiteliais, o que sustenta a investigação da TGase3 em estados de diferenciação relevantes para a doença e na biologia tumoral.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TGase3 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene TGM3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do TGM3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do TGM3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TGase3.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de TGM3 para a investigação da sinalização de TGase3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) TGM3 críticos para a função TGase3
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos TGM3 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo TGase3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo TGase3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus TGM3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo TGase3 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR TGase3 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia TGM3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo TGM3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.