TFIIIC110 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404261-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TFIIIC110O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase TFIIIC110 (h) e o Plasmídeo Double Nickase TFIIIC110 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GTF3C2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:TFIIIC110 Anticorpo (2395C2a): sc-81406
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TFIIIC110 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404261-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TFIIIC110 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404261-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GTF3C2 codifica o TFIIIC110, uma subunidade central do complexo TFIIIC que reconhece elementos promotores internos em genes transcritos pela RNA polimerase III, incluindo tRNAs e outros pequenos RNAs não codificantes. Ao dar suporte ao recrutamento do TFIIIB e à montagem do complexo de pré-iniciação da Pol III, o TFIIIC110 contribui para programas basais de transcrição que acoplam o metabolismo de RNA ao crescimento celular e às respostas ao estresse. O TFIIIC também interage com a organização da cromatina e a arquitetura nuclear, conectando loci da Pol III a características mais amplas de regulação do genoma. A desregulação do controle transcricional da Pol III e de subunidades do TFIIIC tem sido associada a estados proliferativos e a alterações na homeostase de pequenos RNAs, tornando o GTF3C2 um alvo útil para estudos mecanísticos de transcrição e regulação genômica.
TFIIIC110 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GTF3C2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GTF3C2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GTF3C2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GTF3C2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.