Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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Tenascin-R Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423465
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Tenascin-R O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Tenascin-R, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Tenascin-R Anticorpo (A-2): sc-376341
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Tenascin-R Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423465 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Tnr codifica a Tenascina-R, uma glicoproteína da matriz extracelular enriquecida no sistema nervoso central que modula interações célula–célula e célula–matriz durante o desenvolvimento neural e a maturação dos circuitos. A Tenascina-R contribui para o crescimento de neuritos, o direcionamento axonal, a estabilização sináptica e a mielinização, em parte por meio de interações com moléculas de adesão e proteoglicanos que moldam a rede perineuronal. Ao influenciar a sinalização extracelular e a plasticidade estrutural, ela afeta processos como a conectividade neuronal e a remodelação dependente da atividade. Alterações na função ou na expressão da Tenascina-R têm sido associadas a fenótipos do neurodesenvolvimento e neuropsiquiátricos, tornando-a relevante para o estudo dos mecanismos subjacentes à organização sináptica e à excitabilidade de redes em modelos murinos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Tenascin-R (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Tnr em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Tnr, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Tnr na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Tenascin-R.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Tnr para a investigação da sinalização de Tenascin-R, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Tnr críticos para a função Tenascin-R
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Tnr para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Tenascin-R Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Tenascin-R Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Tnr. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Tenascin-R Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Tenascin-R (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Tnr para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Tnr definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.