Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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TDG Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-416599-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TDGO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase TDG (h) e o Plasmídeo Double Nickase TDG (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para TDG. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:TDG Anticorpo (D-11): sc-376652
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TDG Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-416599-NIC | 20 µg | $410.00 |
A glicosilase de DNA de timina (TDG) é uma enzima de reparo por excisão de base que remove timina ou uracila de incompatibilidades G:T e G:U decorrentes da desaminação da 5-metilcitosina, ajudando a preservar a integridade do genoma. Além do reparo canônico, a TDG contribui para a desmetilação ativa do DNA ao processar derivados oxidados da 5-metilcitosina em conjunto com enzimas TET, ligando-a à regulação epigenética da transcrição. Por meio dessas atividades, a TDG influencia o reparo acoplado à replicação e à transcrição, o estado da cromatina e as respostas celulares a danos no DNA. Alterações na função ou na regulação da TDG são frequentemente estudadas no contexto de carga mutacional, instabilidade do epigenoma e programas de expressão gênica associados ao câncer.
TDG O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus TDG em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de TDG. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função TDG. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com TDG interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.