TCP-11 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423314
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- TCP-11 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico TCP-11, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
TCP-11 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423314 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Tcp11 codifica la proteína asociada al esperma TCP-11, un factor enriquecido en el testículo implicado en las etapas tardías de la espermatogénesis y en la maduración funcional de los espermatozoides. TCP-11 se ha relacionado con procesos que determinan la estructura del flagelo y regulan la motilidad, influyendo en la señalización asociada a la capacitación y en la competencia para la fecundación. En modelos murinos, la alteración de la expresión o la función de Tcp11 se asocia con una menor calidad espermática y fenotipos de subfertilidad, lo que lo hace relevante para estudiar las contribuciones genéticas a los trastornos reproductivos masculinos. Su perfil de expresión restringido también respalda su uso como marcador en estudios de diferenciación de células germinales y en investigación de toxicología reproductiva.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO TCP-11 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Tcp11 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Tcp11 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Tcp11 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TCP-11.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Tcp11 para la investigación de la señalización de TCP-11, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Tcp11 críticos para la función de TCP-11
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Tcp11 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido TCP-11 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido TCP-11 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Tcp11. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TCP-11 (m) y el plásmido HDR TCP-11 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Tcp11 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Tcp11 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.