TCF-1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-401584

개요

TCF7는 정형적 Wnt/β-카테닌 신호전달을 계통(specification)을 규정하는 유전자 프로그램과 통합하는, T 세포에 제한적으로 발현되는 HMG-box 전사인자인 TCF-1을 암호화합니다. TCF-1은 흉선세포(thymocyte) 발달을 형성하고 T 세포 전구세포의 유지를 돕는 한편, β-카테닌 및 Groucho/TLE와 같은 보조인자(cofactor)와의 협력을 통해 상황 의존적인 전사 활성 또는 억제를 수행하여 분화 결정 과정을 조절합니다. 성숙 림프구에서 TCF-1은 효과기(effector) 상태와 기억(memory) 연관 상태 간의 균형에 영향을 미치며, 면역 항상성을 조절하는 염색질 및 전사 네트워크에도 기여합니다. TCF7/TCF-1 의존 프로그램의 조절 이상은 면역세포 분화의 변화와 연관되어 왔고, 면역매개 병리 및 혈액암에서의 전사 프로그램 재배선(transcriptional rewiring) 맥락에서 연구되고 있습니다.

TCF-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 TCF7 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 TCF7 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 TCF7의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 TCF-1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 TCF-1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 TCF7 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• TCF-1 기능에 중요한 TCF7 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 TCF7 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• TCF-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 TCF-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 TCF7 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  TCF-1 HDR 플라스미드 (h) 및 TCF-1 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 TCF7 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 TCF7 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.