TBX19 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406919

概要

TBX19（T-box転写因子19、TPITとしても知られる）は、下垂体のコルチコトロフ系譜に特異的に発現する転写因子であり、コルチコトロフのアイデンティティの決定および維持に必須です。TBX19は、プロオピオメラノコルチン（POMC）の転写と、それに続く視床下部—下垂体—副腎（HPA）軸のシグナル伝達を制御する遺伝子発現プログラムを調節し、より広範なT-box依存的な発生経路とも統合されて機能します。内分泌細胞の分化やホルモン産生細胞の機能を形作ることから、TBX19は下垂体の器官形成や転写制御を研究するうえで、マーカーとして、また機構的ハブとして広く用いられています。TBX19活性の変化はコルチコトロフ機能の破綻や先天性の内分泌表現型と関連づけられており、下垂体機能不全の疾患モデル研究における重要性を支持しています。

TBX19 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるTBX19遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、TBX19内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、TBX19のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、TBX19タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、TBX19シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、TBX19欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• TBX19の機能に不可欠なTBX19エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、TBX19ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• TBX19 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびTBX19 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、TBX19遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  TBX19 HDRプラスミド（h）および TBX19 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはTBX19ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のTBX19標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。