TBL2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407010

Visão geral

TBL2 (transducina beta-like 2) é uma proteína associada ao retículo endoplasmático, implicada na sinalização próxima à membrana e na proteostase, com funções descritas na regulação de respostas celulares ao estresse e no controle da tradução. Ao conectar a homeostase do RE a redes de sinalização, a TBL2 é estudada em contextos nos quais o manejo de proteínas mal dobradas, a biologia de lipídios e membranas e vias adaptativas de estresse influenciam decisões sobre o destino celular. Alterações na regulação do estresse do RE e da sinalização metabólica relacionada têm sido associadas a fenótipos inflamatórios e metabólicos, tornando a TBL2 um alvo útil para estudos mecanísticos desses processos. Em modelos de células humanas, a perturbação de TBL2 permite investigar como nós de sinalização ligados ao RE moldam a saída das vias sob estresse nutricional, oxidativo ou proteotóxico.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TBL2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene TBL2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do TBL2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do TBL2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TBL2.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de TBL2 para a investigação da sinalização de TBL2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) TBL2 críticos para a função TBL2
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos TBL2 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo TBL2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo TBL2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus TBL2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo TBL2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR TBL2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia TBL2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo TBL2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.