TARC CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-422837

개요

Ccl17은 흉선 및 활성화 조절 케모카인(TARC/CCL17)을 암호화하며, TARC는 분비형 CC 케모카인으로서 CCR4에 결합해 Th2 세포와 조절 T 세포를 포함한 CCR4-양성 T 세포 아형들의 화학주성을 유도합니다. 마우스 면역 조직에서 TARC는 백혈구 이동(trafficking)에 기여하여 염증성 침윤 세포의 구성과 분극을 형성하고, 항원에 의해 유도되는 면역 반응을 조율합니다. Ccl17 발현은 흔히 골수계 및 기질(stromal) 구획에서 사이토카인 신호전달과 패턴 인식 수용체 활성화의 하위 경로에서 유도되어, 선천면역의 신호를 적응면역 세포의 유입(recruitment)과 연결합니다. 조절 이상이 발생한 Ccl17/TARC 신호전달은 알레르기형 염증 및 면역 매개 병리와 연관되어 있어, 케모카인 기울기, 장벽 염증, 그리고 T 세포–골수계 상호작용(crosstalk)을 연구하는 데 유용한 핵심 노드입니다.

TARC CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Ccl17 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Ccl17 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Ccl17의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 TARC 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 TARC 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Ccl17 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• TARC 기능에 중요한 Ccl17 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Ccl17 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• TARC CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 TARC CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Ccl17 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  TARC HDR 플라스미드 (m) 및 TARC HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Ccl17 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Ccl17 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.