非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
TAF II p135 抗体 (22): sc-136093. HeLa 核提取物 (A), ES-D3 全细胞裂解液 (B) 和小鼠卵巢组织提取物 (C) 中 TAF II p135 表达的 Western 印迹分析.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
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TAF II p135 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-404230
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- TAF II p135 CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在TAF II p135基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：TAF II p135: sc-136093，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
TAF II p135 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-404230 | 20 µg | $397.00 |
概述
TAF4 编码 TAF II p135，是 TFIID 复合体的核心亚基之一，可与 TBP 及其他 TAF 协同，启动 RNA 聚合酶 II 依赖的转录。TAF II p135 通过与序列特异性转录因子及染色质相关调控因子的相互作用，参与启动子识别、转录预起始复合体的组装，并调控与细胞状态相关的基因表达程序。TAF4 的功能与染色质重塑和转录共激活子网络密切相关，因此与细胞增殖、分化以及应激响应性转录的调控相联系。TFIID/TAF 活性失衡及转录起始异常常在致癌性转录重编程及其他基因调控紊乱相关疾病的研究中被重点关注。
TAF II p135 CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中TAF4基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对TAF4基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏TAF4开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使TAF II p135蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建TAF4缺失的细胞模型，用于TAF II p135信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 TAF II p135 功能至关重要的 TAF4 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 TAF4 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 TAF II p135 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 TAF II p135 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 TAF4 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 TAF II p135 HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 TAF II p135 HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由TAF4同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定TAF4靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。