T2R38 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402279-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- T2R38O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase T2R38 (h) e o Plasmídeo Double Nickase T2R38 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para TAS2R38. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
T2R38 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402279-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
T2R38 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402279-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O TAS2R38 humano codifica o recetor de sabor amargo T2R38, um GPCR de classe A mais conhecido por detetar compostos que contêm tioureia e iniciar a sinalização canónica de GPCR através de proteínas G heterotriméricas, modulação de segundos mensageiros e programas de transcrição a jusante responsivos a MAPK. Para além da gustação, a expressão de T2R38 nas vias aéreas e noutros contextos epiteliais tem sido associada à regulação quimiossensorial de respostas inatas de barreira, incluindo vias que influenciam a atividade ciliar e a sinalização antimicrobiana. Haplótipos comuns de TAS2R38 alteram a responsividade do recetor e têm sido estudados em relação a diferenças interindividuais na perceção do amargo, no comportamento alimentar e nas interações hospedeiro–ambiente. Estas características tornam o TAS2R38 um modelo útil para dissecar a especificidade de ligandos de GPCR, a dinâmica da transdução de sinal e fenótipos dependentes do genótipo.
T2R38 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus TAS2R38 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de TAS2R38. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função TAS2R38. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com TAS2R38 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.