Synaptotagmin XICRISPR激活质粒(h): sc-404323-ACT

SYT11 编码人类突触结合蛋白 XI（Synaptotagmin XI），属于突触结合蛋白家族成员，该家族与细胞内膜运输及囊泡动力学的调控相关。突触结合蛋白 XI 与胞吐作用和内吞回收的调控有关，可影响神经元中突触囊泡的周转以及其他分泌细胞类型中更广泛的分泌通路过程。SYT11 通过影响囊泡停泊、融合能力以及细胞器稳态，可与调控神经递质传递、自噬-溶酶体功能和细胞应激反应等通路发生交叉。SYT11 表达改变或遗传变异已在神经退行性疾病及神经炎症相关研究中被报道，支持其用于研究神经元易损性与突触功能障碍机制。

Synaptotagmin XI CRISPR激活质粒（h）提供了一种靶向、非破坏性的方法，可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性SYT11的表达。

Synaptotagmin XI CRISPR激活质粒（h）是一个由三条质粒组成的协同激活介导（SAM）系统，旨在对人类细胞系中的SYT11基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变（D10A 和 N863A）的无催化活性的 Cas9（dCas9）为核心，这些突变消除了核酸酶活性，同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合，并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用，并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA，其与两个MS2 RNA适配体融合，这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点，并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送，以确保系统所有组分的平衡表达。

在靶位点组装完成后，SAM复合物结合于SYT11转录起始位点上游约200 bp处，VP64、p65和HSF1在此协同作用，招募转录 machinery并驱动内源性Synaptotagmin XI表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同， dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列，从而保留了原生的SYT11位点，并能够研究内源性位点上依赖于Synaptotagmin XI的转录反应，使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在SYT11表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟Synaptotagmin XI通路恢复的宝贵工具。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。