Svs6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-423228

概要

マウスSvs6は、精嚢分泌タンパク質6（seminal vesicle secretory protein 6）をコードしており、精液の組成および生物物理学的性質に寄与する雄性生殖路タンパク質です。Svs6は精嚢上皮におけるアンドロゲン応答性の分泌プログラムの一部で、付属腺の分化や管腔側の分泌活性のマーカーとして一般的に用いられます。精漿環境に影響を与えることで、Svs6は精子の生存、運動性、射精後の生殖路における相互作用に関わるプロセスと関連します。精嚢分泌タンパク質の発現変化は、内分泌かく乱、炎症、生殖表現型のモデルでしばしば検討されており、雄性生殖能や付属腺生物学の経路レベルの研究における有用性を裏付けています。

Svs6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるSvs6遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Svs6内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Svs6のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Svs6タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Svs6シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Svs6欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Svs6の機能に不可欠なSvs6エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Svs6ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Svs6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびSvs6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Svs6遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Svs6 HDRプラスミド（m）および Svs6 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSvs6ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSvs6標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。