Svs4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-423226

概要

Svs4（seminal vesicle secretory 4）は、精嚢に多く存在する、雄の生殖管から分泌されるタンパク質をコードしており、精液の組成および機能的性質に関連しています。Svs4は、精液の凝固動態、精子輸送、ならびに精子の生存と受精能獲得を支える生化学的環境に影響を与えることで、交尾後のプロセスに寄与します。その発現は、アンドロゲンにより制御される分泌プログラムおよび副性腺における管腔上皮の分化と密接に結び付いています。精嚢分泌タンパク質の制御異常は、内分泌かく乱や雄性生殖組織における炎症性／変性変化の指標として用いられており、Svs4は受胎能に関連する表現型の機序研究における有用なマーカーとなります。

Svs4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるSvs4遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Svs4内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Svs4のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Svs4タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Svs4シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Svs4欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Svs4の機能に不可欠なSvs4エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Svs4ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Svs4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびSvs4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Svs4遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Svs4 HDRプラスミド（m）および Svs4 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSvs4ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSvs4標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。