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Superoxide Dismutase 1/SOD1双切口酶质粒(m) | sc-423069-NIC | 20 µg | $410.00 |
小鼠 **Sod1** 基因编码超氧化物歧化酶1(SOD1),这是一种位于细胞质、依赖铜/锌的抗氧化酶,可催化超氧阴离子自由基歧化生成过氧化氢和氧,从而限制对蛋白质、脂质和核酸的氧化损伤。SOD1 的活性与细胞氧化还原稳态通路相互整合,包括谷胱甘肽体系以及过氧化氢酶/过氧化还原蛋白(peroxiredoxin)系统,并在氧化应激条件下影响线粒体功能、蛋白质稳态(proteostasis)和炎症信号传导。SOD1 功能失调或聚集在神经退行性变和运动神经元易损性研究中被广泛关注;此外,Sod1 表达改变也常用于模拟衰老、代谢应激和毒物暴露中的氧化损伤。因此,Sod1 是研究活性氧(ROS)清除处理机制、应激反应信号以及下游损伤相关通路的常用靶点。
Superoxide Dismutase 1/SOD1 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Sod1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Sod1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Sod1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Sod1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。