SUMO-4 Plasmídeo de ativação de CRISPR (h): sc-403123-ACT

O gene humano **SUMO4** codifica a **SUMO-4**, um pequeno modificador semelhante à ubiquitina que regula a função de proteínas por meio da **SUMOilação**, influenciando a localização subcelular, a estabilidade e as redes de interação. A modificação pós-traducional dependente de SUMO-4 tem sido associada à sinalização responsiva ao estresse e à modulação de programas transcricionais, incluindo vias que convergem para o **NF-κB** e para a regulação da imunidade inata. Ao ajustar a dinâmica da SUMOilação, a SUMO-4 pode afetar a proteostase e os limiares de sinalização inflamatória em tecidos imunes e metabolicamente ativos. Variações em **SUMO4** têm sido estudadas no contexto da biologia de doenças autoimunes e inflamatórias, tornando-o um alvo útil para estudos mecanísticos de sinalização imune e respostas celulares ao estresse.

SUMO-4 O Plasmídeo de Ativação CRISPR (h) oferece uma abordagem direcionada e não destrutiva para regular positivamente a expressão endógena de SUMO4 sem alterar a sequência de ADN subjacente.

SUMO-4 O Plasmídeo de Ativação CRISPR (h) é um sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) de três plasmídeos, concebido para a regulação positiva transcricional altamente eficiente e específica do locus SUMO4 em linhas celulares humanas. O sistema é construído em torno de uma Cas9 cataliticamente inativa (dCas9) portadora de duas mutações inativadoras (D10A e N863A) que eliminam a atividade nuclease, preservando simultaneamente a ligação ao ADN. Esta dCas9 é fundida com VP64, um potente ativador transcricional, e é coexpressa com um gene de resistência à blasticidina para seleção. O segundo plasmídeo codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1, um complexo ativador secundário que atua em conjunto com o dCas9-VP64, juntamente com um gene de resistência à higromicina. O terceiro plasmídeo codifica um sgRNA de 20 nt específico para o alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 que recrutam o complexo MS2-p65-HSF1 para o local de ativação, acompanhado por um gene de resistência à puromicina. Os três plasmídeos são administrados numa proporção de massa de 1:1:1 para uma expressão equilibrada de todos os componentes do sistema.

Uma vez montado no locus alvo, o complexo SAM liga-se a cerca de 200 pb a montante do local de início da transcrição SUMO4, onde VP64, p65 e HSF1 atuam em conjunto para recrutar a maquinaria transcricional e impulsionar a regulação positiva da expressão endógena de SUMO-4. Ao contrário da Cas9 com atividade nuclease, o dCas9 não introduz quebras de cadeia dupla nem modifica a sequência genómica, preservando o locus SUMO4 nativo e permitindo o estudo de respostas transcricionais dependentes de SUMO-4 no locus endógeno, tornando-o uma ferramenta valiosa para estudos funcionais, identificação de genes-alvo e modelagem da restauração da via SUMO-4 em células tumorais com expressão de SUMO4 silenciada ou reduzida.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.